寄生蟲怎麼保存
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寄生蟲怎麼保存,在寄生蟲學實驗研究中,過去通常應用接種實驗動物和體外人工培養等方法進行寄生蟲的保種,但是有時候會不小心破壞寄生蟲的保存。以下分享寄生蟲怎麼保存?
蠕蟲成蟲的固定與保存
1、線蟲
生理鹽水洗淨蟲體粘附的污物,然後用加熱至70~80℃的70%酒精或巴氏液(甲醛3份、生理鹽水97份)固定,冷卻後移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型線蟲(旋毛蟲、蟯蟲、鉤蟲等)宜用甘油酒精(70%酒精95ml、甘油5ml)加熱固定,保存於80%酒精中。也可用冰醋酸固定約半小時後移入70%酒精或甘油酒精中保存。
2、吸蟲
小型吸蟲可置於小瓶中,加生理鹽水,用力搖盪數分鐘,倒去生理鹽水,注入固定液。較大的吸蟲應先放在薄荷腦酒精液(薄荷腦24g、95%酒精10ml)中,使蟲體肌肉鬆馳,用載玻片壓平後固定
或將洗淨後的吸蟲放在兩片載玻片間用細線緊扎壓平後固定。一般用10%福[爾]馬林固定,24h後移至5%福[爾]馬林中保存,也可用70%酒精固定0、5~3h,視蟲體大小而定,再移至新的70%酒精中保存。
3、絛蟲
大型絛蟲如豬、牛帶絛蟲,可將蟲體浸入自來水中8~12h,使蟲體在水中充分伸展、鬆馳,然後移至3%福[爾]馬林溶液中固定,24~28h後轉置5%福[爾]馬林溶液中保存。小型絛蟲可先在生理鹽水中清洗數次,然後於3%福[爾]馬林溶液中固定3~5h,再移入5%福[爾]馬林溶液中保存。
如需染色製片時,將蟲體從上述3%福[爾]馬林溶液中取出後置載玻片上,用另一載玻片輕壓,沿載玻片邊緣滴加5%福[爾]馬林溶液固定數小時,最後移至5%福[爾]馬林溶液中保存。
三、昆蟲的保存
1、幹標本的保存
系保存有翅昆蟲。可用特製的昆蟲針針插蟲體。大型昆蟲如蠅、虻等用1~3號昆蟲針,從蟲體背面、中胸右側直插。注意保存左側完整,以便鑑定。
小型昆蟲如:蚊、蛉、蚋、蠓等,取00號短針插入軟木片的一端,然後用這個00號短針自胸部腹面、兩中足基部之間插入,不可刺透胸背,再用另一長針從軟木片的另一端插入,將針插好的昆蟲插入昆蟲盒的軟木板上。盒內放入紙包的樟腦粉防蛀。
2、溼標本的保存
用於保存有翅昆蟲的卵和幼蟲期及其無翅昆蟲和蜱蟎類的發育各期。活標本先經加溫70%酒(60~70℃)固定,1d後保存於甘油酒精中,也可用5%或10%福[爾]馬林和巴氏液固定保存。
四、原蟲的低溫保存
用液氮保存原蟲,具有保持原蟲的生物學特性且保存時間較長(1~2年)的優點。現僅介紹瘧原蟲和陰道毛滴蟲的低溫保存方法。
1、凍存方法
(1)鼠瘧原蟲從感染瘧原蟲第3~4d的小鼠尾部(或心臟)取血,在1mm3陽性鼠血加0、1mm3的3、8%枸椽酸鈉抗凝之後,按0、5~1、0ml分裝入無菌安瓿(或塑料管)內,封口(或蓋嚴)後,放入標明日期的紗布袋中,裝於液氮罐的提筒內,立即直接置液氮中保存。
(2)陰道毛滴蟲用無菌拭子取陰道分泌物,放入培養基中培養48h,轉種於RPMI-1640培養基中2d。取含蟲培養液經1000rpm離心10min,在沉澱中加入10%DMSO2ml,如上法分裝及凍存。
2、復甦與觀察需要時從液氮罐中取出保種小管,迅速投入37~40℃溫水中,經4~5min即溶化。將陰道毛滴蟲接種於肝浸湯培養基上,37℃培養3~4d後,塗片鏡檢活動的滋養體,或染色觀察。凍存的鼠瘧原蟲,經腹腔接種小鼠,每隻0、2ml,接種後4~5天取鼠尾血,塗片,姬氏液染色鏡檢。
寄生蟲標本的保存,除製成玻片標本永久保存外,還可用以下各種保存方法。
一、原蟲包囊和蟲卵的保存
汞碘醛液10ml與糞便1g混勻後密封在瓶內,可保存其中的原蟲包囊及蟲卵數月之久,也可在經濃集法處理的糞便沉渣中加等量或1倍量的10%甲醛液(加熱至70℃),搖勻,用石蠟封固瓶口。
二、蠕蟲成蟲的保存
1、線蟲 生理鹽水洗淨後用加熱至70~80℃的70%酒精或巴氏液(甲醛3份,生理鹽水97份固定,冷卻後移至新的70%酒精或巴氏液中保存。小型線蟲(如旋毛蟲、蟯蟲、鉤蟲等)宜用甘油酒精(70%酒精95ml,甘油5ml)加熱固定,保存於80%酒精中;也可用冰醋酸固定約半小時後移入70%酒精或甘油酒精中保存。
2、吸蟲 小型吸蟲可置於小瓶中,加生理鹽水,用力搖盪數分鐘,倒去生理鹽水,注入固定液。較大的吸蟲應先放在薄荷腦酒精液(薄荷腦24g,95%酒精10ml)中,使蟲體肌肉鬆弛,用載玻片壓平後固定,或將洗淨後的吸蟲放在兩片載玻片間用細線緊扎壓平後固定。
固定一般用10%甲醛,24小時後移至5%甲醛中保存;或用70%酒精固定0、5~3小時,視蟲體大小而定,再移至新的70%酒精中保存。
3、絛蟲 大型絛蟲(如豬、牛帶絛蟲)經清水洗滌數次後,在生理鹽水(4℃)中經過數小時或過夜,蟲體可完全伸展,此時以3%福[爾]馬林固定,24小時後移至5%福[爾]馬林中保存,必要時也可先用大玻璃板壓平後固定。小型絛蟲洗滌後可在3%福[爾]馬林中固定3~5小時,用載玻片輕壓,沿蓋玻片邊緣加5%甲醛固定數小時,最後保存在5%福[爾]馬林溶液中。
新研究顯示瞭如何保存寄生蟲以及爲什麼它很重要
與受到我們關注(以及我們的保護資金)的許多具有超凡魅力的哺乳動物,魚類和鳥類不同,寄生蟲被認爲是可以消滅的東西-當然不是要保護的東西。
但是,只有4%的`已知寄生蟲可以感染人類,而且大多數實際上起到了至關重要的生態作用,例如調節野生生物,否則野生生物可能會擴大種羣規模併成爲害蟲。儘管如此,只有大約10%的寄生蟲被發現,因此,大多數寄生蟲被排除在保護活動和研究之外。
一個國際科學家團體希望改變這種狀況。包括華盛頓大學的切爾西伍德在內的大約十二位主要的寄生蟲生態學家於8月1日在《生物保護》雜誌上發表了一篇論文,其中提出了一項雄心勃勃的全球寄生蟲保護計劃。
華盛頓大學水生與漁業科學學院的助理教授伍德說:“寄生蟲是一個極其多樣的物種,但作爲一個社會,我們並不認爲這種生物多樣性具有價值。”“本文的重點是強調,我們正在失去寄生蟲及其所發揮的功能,甚至沒有意識到它。”
作者提出了下一個十年的12個目標,這些目標可以通過研究,倡導和管理相結合來促進寄生蟲生物多樣性的保護。
北卡羅萊納州立大學論文與項目聯合負責人,副教授斯凱拉爾·霍普金斯說:“儘管我們對大多數寄生蟲物種瞭解甚少,但我們仍然可以採取行動來保護寄生蟲的生物多樣性。”
也許最雄心勃勃的目標是在未來十年內描述世界上一半的寄生蟲。研究人員說,提供分類學描述可以命名物種,這是保護過程的重要組成部分。
另一個項目的共同負責人,喬治敦大學的助理教授科林·卡爾森說:“如果物種沒有名字,我們就無法保存它們。”“幾十年來,我們已經接受了大多數動物和植物的信息,但是科學家只發現了地球上所有寄生蟲的一小部分。那些是最後的前沿:深海,深空和生存的世界在地球上每個物種內部。”
重要的是,研究人員強調,在人類的保護計劃中沒有感染人類或家養動物的寄生蟲。他們說,應該控制這些寄生蟲,以維護人類和動物的健康。
該論文是致力於寄生蟲保存的整個特別版的一部分。伍德是該集合中一項研究的主要作者,該研究發現寄生蟲對環境變化的反應可能很複雜,而且一個不斷變化的世界可能會同時看到某些寄生蟲的暴發和其他寄生蟲物種的全部喪失。
伍德說:“我們需要認識到,寄生蟲類羣之間的反應將是多種多樣的,而不是想當然地認爲每個寄生蟲都在逐漸消滅或即將造成重大疫情。”
寄生蟲通常需要兩個或多個宿主物種才能完成其生命週期。例如,某些寄生蟲首先感染魚類或兩棲動物,但最終必須傳播給鳥類才能繁殖和繁殖。伍德解釋說,他們通過巧妙的方式確保做到這一點,通常是通過操縱第一批宿主的行爲甚至解剖,使這些魚或兩棲動物更容易被鳥類食用。這樣,寄生蟲便會傳播給鳥類-它的最終目的地。
鑑於這種動態,伍德及其同事想知道,如果他們所生活的生態系統發生變化,那麼大量的寄生蟲將會發生什麼。他們在加利福尼亞州中部東灣地區的16個池塘中設計了一個實驗。在一半的池塘中,他們安裝了諸如鳥舍,漂浮的棲息處和野鴨誘餌之類的結構,旨在吸引更多的鳥類,從而暫時改變了自然生態系統並增強了這些池塘中的生物多樣性。
幾年後,研究人員分析了16個池塘中每個池塘的寄生生物多樣性。他們發現了一個混合袋:有些寄生蟲物種通過減少數量來應對鳥類生物多樣性的提高。但是,隨着鳥類生物多樣性的增加,其他寄生蟲的數量實際上也在增加。作者得出結論,隨着生物多樣性的變化-由於氣候變化,發展壓力或其他原因-我們可以期望看到寄生蟲的不同反應,即使是那些生活在同一生態系統中的寄生蟲。
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